在构建健康猪场的过程中,疫病的监测与检测是必不可少的一环。然而在实际中,因为种种原因,一些猪场在采样和送检的过程中,因为对检测过程的不了解,耗费人力、物力和时间却难以得到预期的结果。记者采访到安徽农业大学教授、安徽省生猪产业技术体系疫病防治研究室主任李郁老师,就一些相关问题进行解答。
问题一:猪场在哪些情况下需要进行检测?
李郁:检测要明确目的是什么,一般来说有以下:1、检测与疫病爆发有关的病原或毒素;2、估测单个猪的病原感染或接触状况;3、测定猪群是否感染或接触病原;4、免疫后产生抗体猪群或猪的百分比;5、免疫疫苗后抗体的动态变化;6、监测疫病防控后的效果。以第6点为例,若猪场新用了某个厂家的消毒剂,想了解一下消毒的效果,这就可以在消毒的前后进行采样,如空气、涂布棉拭子等,作病原微生物的检测,从而评估该消毒剂的消毒效果。
问题二:现实中有养殖户就近选择检测机构,也有不远千里送往省外检测,那么选择检测机构需要注意哪些问题?
李郁:现在检测机构不像过去那样很少,逐渐多了起来,但还是要选择权威的机构,因为权威机构在检测方法、人员的能力水平以及所用的设备器材等方面具有优势。
检测方法的好坏直接决定了检测结果的成败。一个好的检测方法应具备如下性质:敏感性、特异性、可重复性、经过实践检验、与金标准(当前临床医学界公认的诊断疾病的最可靠、最准确、最好的诊断方法)方法的符合率。
此外,同一实验室的检测结果有可比意义,同一种检测方法有可比意义,监测贵在坚持,检测贵在及时。
问题三:我们也了解到,有些猪场采样时间很随意,打了疫苗没过几天就送检。那么,采样的时间怎么确定呢?
李郁:要明确具体检测目的,不同的病原检测时间点不一样,不同疫苗免疫后的抗体水平评估时间点不一样。如灭活疫苗和弱毒疫苗,监测点时间就不同,灭活苗产生抗体的时间较长,一般来说3-4周以后才开始检测。此外,猪群健康状况不同,评估时间点也不一样。所以恰当的送检时间非常重要。
问题四:有养殖户采样基本是只知道血样,没有正确采样对检测结果是不是影响很大?
李郁:检测目的不同,采集的样品材料也不相同。前些天,有一个养殖户在没有任何沟通的情况下,将发生腹泻的猪的血液采了过来,检测引起腹泻的病原应该采集排泄物(肛拭子)或小肠内容物。
猪场在送检之前一定要与送检的检测实验室沟通,把猪群的情况和检测目的告诉对方,对方会告诉猪场应该采什么样品,采多少数量。
问题五:采样多少才合适,这也是养殖场经常遇到的问题,数量怎么确定?
李郁:上面也说了,先事先和检测机构联系,确定数量。采集的样品应具有代表性和随机性。病原检测应选择临床症状典型、能代表整个猪群发病特点的病猪2~3头;细菌性病原检测应在送检前5~7天内避免使用抗生素类药物;抗体检测大样本数量≥30,小样本数量<30。基于成本考虑,每个阶段采样5~10份。
问题六:那么在具体采样和保存过程中需要注意哪些问题?
李郁:首先要做好使用器械的消毒灭菌工作,注意人身安全防护。内脏病料采取最好剖检活体(新鲜),若患畜死亡6小时以上(冬季)则不予采取病料,夏天绝对不能超过3小时,否则肠道细菌会干扰检测结果;采集血液样品应在8小时前停止饲喂,但应供给饮水。
运输需要冷链。病原检测(病料):分离细菌样品冷鲜保存(2~8℃),分离病毒样品冷冻保存(-15~-20℃),短时间送检。抗体检测(血液):前腔静脉或耳缘静脉采血2~5mL ,全血需要加抗凝剂并在采血后混匀,分离血清是采血不能加抗凝剂,冷藏保存,避免震荡造成溶血,尽快送检。
问题七:拿到报告后,养殖户怎么正确分析结果,采取措施?
李郁:疫病检测的意义关键在正确的选择检测方法、检测试剂并且结合临床诊断进行综合分析,也就是说并不能靠单纯的阴阳性来简单地判定结果,而是要提供尽可能详细的背景资料,比如猪群健康状况、免疫程序、检测样本猪的日龄、使用药物等等,越详细越好,这样有利于综合分析,得出正确的诊断结果。
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1.全血的采集方法:使用抗凝真空采血管(由检测中心提供)采集,采集的血液经密封后贴上标签,立即冷藏4℃送实验室。
2.血清的采集方法 :使用真空采血管采血,室温下倾斜放置30分(防止暴晒),待血液自然凝固,明显分层析出血清,贴标签,4℃冷藏。
3.粪便样品的采集:①病毒、细菌检验样品 以灭菌的棉拭子从直肠深处或泄殖腔黏膜上蘸取粪便,密封,贴标签,4℃冷藏。用自封袋采取未落地的粪便。②寄生虫检验样品 新排出的粪便或直接从直肠内采得,保持虫体或虫体节片及虫卵的固有形态。粪便样品以冷藏不冻结状态保存,贴标签。
4.实质脏器的采取:①病原分离的组织样品 以烧红的剪刀剪下部分病变组织,贴上标签,4℃冷藏。(用75%的医用酒精彻底消毒采样刀片、剪刀、镊子等,每个脏器分装不同袋子)②病毒检验样品 用消毒的器械切取脏器,放入灭菌容器内,密封,贴上标签,4℃冷藏。
5.畜禽肠管及肠内容物样品采集:①肠管的采集:用线扎紧病变 明显处(约5~10厘米)的两端,自扎线外侧剪断,放入灭菌容器中,密封,贴上标签,4℃ 冷藏。②肠管内容物的采集:选择病变明显部位,取内容物,用灭菌生理盐水冲洗;也可烧烙肠壁表面,用吸管扎穿肠壁,吸取内容物,放入保存液中送检。
《农财宝典》-新牧网记者 苏皖中
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