伪狂犬变异株：抗原性改变疫苗保护不够

　　专家简介：

　　童光志：研究员。现任中国农业科学院上海兽医研究所所长、中国动物卫生与流行病学中心上海分中心主任，中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术分会理事长、中国微生物学会兽医微生物分会副主任委员、中国畜牧兽医学会禽病学分会副理事长、“十五”国家“863”生物与现代农业领域基因操作主题专家委员会委员、“973”项目首席科学家。国家生猪产业体系猪病防控岗位专家。

　　姜平：教授，博士生导师，南京农业大学动物医学院预防兽医学系主任，农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室主任。国家农业转基因生物安全委员会专家委员；国家生猪产业体系猪病防控岗位专家。先后主持国家和部省级研究课题25项。主编出版面向21世纪课程《兽医生物制品学》和其它专著4部，获部省级科技进步奖6项，国家科技发明专利2项。

　　农财宝典：伪狂犬病毒在沉寂了数十年之后，近几年又有了抬头的趋势。近年来，山东、河南等省份猪伪狂犬病严重，而2013年广东省的猪场也遭受到了伪狂犬病毒的袭击，这两者有关联性吗？2013年猪场伪狂犬主要的流行性病学状况如何？

　　童光志：我们在2012年从免疫猪群发病仔猪脑中分离到变异伪狂犬病毒JS2012，暂时没有做流行病学调查。山东、河南与广东爆发的伪狂犬病应该差不多，具有一定的相关性的。我们在分离到变异的伪狂犬病毒后，在实验室进行了回归试验，证明其致病力之后，在变异株的基础上构建了gE-gI基因缺失、EGFP插入的重组伪狂犬病毒弱毒。与分离得到的变异伪狂犬毒株相比，基因缺失后，其致病力明显降低了。

　　姜平：2013年，我们共检测了1864份送检的血清样品，对其进行抗体检测，其中伪狂犬病毒gB抗体阳性率为94.1%，而gE抗体阳性率为50.78%。此外，我们还分离得到31份阳性病料。近4年来，检测的抗体阳性率比例一直呈上升趋势，2013年的阳性率近50%。猪场伪狂犬病净化难度加大，应该引起我们的注意。我们现在在对分离得到的变异的猪伪狂犬病毒进行致弱，致弱之后再研制疫苗。

　　农财宝典：近期分离得到的猪伪狂犬变异毒株与以前流行的猪伪狂犬病毒毒株最主要的区别是什么？临床症状是否有区别？如何区分？

　　姜平：我们在2012年底到2013年初的时候分离得到的变异伪狂犬病毒，其临床病理症状与以前的猪伪狂犬病毒造成的临床症状并没有明显区别，还是主要以母猪流产和仔猪的神经性症状为主，从临床症状上并不太容易区分。对新分离的变异伪狂犬病毒，我们的研究也还在进行中。

　　童光志：猪伪狂犬病毒的基因片段共有150Kb个碱基对，比一般的病毒基因组大十倍。经基因序列比对，我们发现其突变位点有很多，但是现在还没办法对变异基因位点进行深入分析，因为碱基对实在太多，每个突变位点进行比对的工程量太大，所以，发生突变的基因位点，其突变之后有何意义尚不明确，具体是哪一个突变位点导致它的抗原性发生变化，现在还无从得知。

　　农财宝典：变异的猪伪狂犬病毒与以前流行的猪伪狂犬病毒在病毒的致病力、抗原性等差异是否明显？主要有哪方面的区别？

　　姜平：我们的初步结论是，变异的猪伪狂犬病毒的抗原性发生了明显变异。我们用传统毒株和变异毒株进行攻毒对比试验，选择85日龄的猪只，采用鼻腔接种的方法。试验发现，接种变异猪伪狂犬病毒的猪只全部死亡，而接种传统的猪伪狂犬病毒毒株并不死亡。而且，由变异猪伪狂犬病毒致死的猪只，不管是肉眼病变还是组织病变，都具有明显的病理变化；特别是在肺脏组织，其造成的组织病变比传统的猪伪狂犬病毒病变更加明显。此外，我们还进行了猪伪狂犬病毒血清病毒交叉中和试验，结果也表明其抗原性发生了明显变化。

　　童光志：我认为对于变异的猪伪狂犬病毒致病性增强的结论应该谨慎，因为猪伪狂犬病毒在全球流行时间已经有100年，与以前我们没有接触到的伪狂犬病毒相比，毒力孰强孰弱还不能确定。同时，猪伪狂犬病毒对猪只的临床感染不太稳定，因而我们选择绵羊这一猪伪狂犬病毒的易感动物作为试验对象；在接种了JS2012猪伪狂犬病毒后，现有疫苗免疫的绵羊不能完全抵抗JS2012猪伪狂犬病毒的攻击，说明其免疫原性发生了显著改变。

　　农财宝典：目前，对于猪伪狂犬病的监测，有些猪场采用检测gE抗体，有些猪场则监测gB抗体，还有些猪场监测gI抗体，猪场在伪狂犬病毒的抗体监测上，选用哪一种更合适？猪场在免疫了伪狂犬疫苗后，抗体水平需要达到多少才合适？

　　姜平：目前对于猪场免疫伪狂犬疫苗后，其抗体评价还没有统一的标准，具体多高的抗体水平能对猪群产生保护力还不是很明确。

　　童光志：我们现在在做抗体评价，但还没有结果，现在也不方便公布。现在市场上的猪伪狂犬疫苗大多是gE基因缺失的，因而检测gE抗体能够很好的区分猪场是否有猪伪狂犬病毒的野毒感染。

　　农财宝典：现在市场上的猪伪狂犬疫苗对变异的猪伪狂犬病毒的交叉保护力如何？

　　童光志：疫苗的交叉保护试验相对比较复杂，评价试验需要用猪进行评价，需要用妊娠母猪进行攻毒保护试验，一个试验下来需要的花费约30万元，一般的实验室也不会进行这方面的研究。我们现在也只是在研究中，具体结果出来还需要一段时间。

　　《农财宝典》记者何觅之